据Pancreas(1999，18：133)载 日本东京Nippon医学院外科Nakamura等介绍了十二指肠灌洗液（DLF）第12密码K-ras点突变检测诊断胰腺癌的新方法。
研究共纳入107例患者，其中胰腺癌23例，非癌症胰腺疾病21例，胆道良性疾病63例。23例胰腺癌病人中，18例经手术病理组织学检查证实，另外5例根据临床表现诊断。21例非癌症胰腺疾患病人中，慢性胰腺炎12例，胰腺粘蛋白囊腺瘤6例，胰腺囊肿3例。63例胆道疾患病人中胆囊结石39例，胆总管结石17例，胆囊腺肌瘤病2例，5例胆道未见异常。
DLF采集方法如下：将内窥镜送入十二指肠第2部分，通过操作管注入50ml蒸馏水，然后通过吸引装置收集DLF(1)。随后行内镜逆行胰胆管造影（ERCP），ERCP后再用同样方法收集DLF(2)，从胰管插管收集纯胰液（PPJ）。收集到的DLF及PPJ经过处理后作K-ras基因突变检测。
结果显示，胰腺癌病人DLF(1) K-ras突变检测阳性率为60.9%（14/23例），DLF(2)K-ras基因突变检测阳性率为76.2%（16/12例），PPJ K-ras突变检测阳性率为70%（14/20例），DLF 和PPJ标本阳性率无显著差异。收集DLF(1)和DLF(2)二份标的病人DLF(1)和（或）DLF(2)K-ras突变阳性率为90.5%（19/21例）。23例胰腺病人都在DLF和 PPJ中检测到K-ras基因突变，其中6例PPJ阴性，但DLF(1)或DLF(2)为阳性。非癌性胰腺疾病病人DLF(1)K-ras基因突变阳性率为9.5%（2/21例），DLF(2)为36.8%7/19例），PPJ为50%（6/12例）。DLF(1)阳性率显著低于PPJ（P=0.0152）。胆道疾病病人DLF(1)K-ras基因突变阳性率为4.8%。综上所述，Nakamura认为，DLF K-ras检测诊断胰腺癌比 PPJK-ras检测敏感性和特异性都高，可作为诊断胰腺癌的一种有用的新方法。
此方法的优点为：①与收集PPJ及细针穿刺针吸活检相比，收集DLF较容易而且并发症少；②胰管插管造成的胰管上皮损伤和增生反应，可使K-ras突变检测阳性率增高，而收集DLF(1)不需插管，因而可增加诊断胰腺癌的特异性；③其敏感性及特异性均高于PPJ。
